El mecanismo de acción de Endostatina

Definición de endostatina
La endostatina es el más eficaz, los mejores resultados experimentales de los inhibidores de la angiogénesis tumoral, en los últimos años mucha atención, los Estados Unidos ha sido etapa Ⅰ y Ⅱ ensayos clínicos, y puede convertirse en una nueva generación de fármacos antitumorales.
Estructura de Endostatina
La endostatina es un inhibidor endógeno de la angiogénesis aislado del sobrenadante del tumor de células endoteliales de ratón cultivado (EOMA) en 1997 por O’Reilly et al., Una proteína de 20 kd de peso molecular. El análisis de la secuencia de aminoácidos mostró que la endostatina era la porción C-terminal del colágeno 18, con un total de 184 aminoácidos. La endostatina es el producto de degradación del colágeno 18, el proceso de degradación incluye al menos dos etapas de hidrólisis enzimática, implicada en la hidrólisis enzimática de la elastasa, catepsina L y metaloproteinasas de matriz. Otro análisis de la estructura cristalina reveló que la estructura de la endostatina tenía una región básica que consistía en 11 residuos de arginina como un sitio de unión a la heparina, lo que explicaba las propiedades de alta afinidad de la endostatina a la heparina y posiblemente la región y los factores angiogénicos compiten con la heparina, Angiogénesis Sin embargo, los estudios han demostrado que la unión de la endostatina a la pared del vaso no depende del sitio de unión a la heparina y no tiene ningún efecto inhibitorio competitivo con FGF-2. Además, se encontró en la secuencia de endostatina un sitio de unión a iones de cinc compuesto por su 3-terminal 3, 3, 11, 3 histidina y 76º residuo de ácido aspártico en el extremo N-terminal del N-terminal y zinc y endostatina N- Lateral para formar una estructura dimérica. Se sugirió que la endostatina y la unión a iones de cinc eran importantes para su actividad anti-angiogénica, pero estudios posteriores sobre la eliminación de sitios de unión a iones de cinc mediante modificación genética indicaron que la endostatina inhibía la migración de células endoteliales y el crecimiento tumoral sin confiar en sitios de unión de iones zinc.
La función biológica de la endostatina
La endostatina inhibe específicamente la proliferación de células endoteliales vasculares inducidas por bFGF, inhibe la migración de células endoteliales, induce apoptosis de células endoteliales, pero para células no endoteliales, tales como células de músculo liso, fibroblastos 3T3, Lewis células de cáncer de pulmón y por lo tanto ningún efecto inhibitorio. Kim et al. También se demostró que la endostatina inhibe la capacidad de las células endoteliales de la vena umbilical humana de penetrar en la membrana basal artificial y es dependiente de la dosis en relación con los efectos inhibidores.
2, la inhibición de la endostatina de la angiogénesis: En la actualidad, una variedad de experimentos pueden confirmar la endostatina en el crecimiento de los vasos sanguíneos inhiben el tejido vascular estático no funciona. O’Reilly y así sucesivamente a través del experimento de membrana corioalantóica del embrión de pollo (CAM), con E. coli o la expresión de baculovirus de endostatina mostraron una inhibición significativa de la angiogénesis embrionaria del pollo, y ninguna toxicidad. Bloch y otros estudios han demostrado que la endostatina no afecta a la cicatrización de heridas, la contracción de la herida, la infección de la herida y la regeneración epitelial de la herida, pero puede reducir la formación de tejido de granulación. Yin y así llevará el endostatina gen recombinante lentivirus inyectado TNF inducida por la artritis reumatoide de ratón primario en la articulación, los resultados muestran que la endostatina puede inhibir la angiogénesis intravascular y la formación de pannus, reducir los avances reumatoides en la artritis. Al indicar que la endostatina no sólo puede inhibir la angiogénesis tumoral, la inflamación vascular patológica también inhibe el papel.
3, endostatina en el crecimiento tumoral y la inhibición de metástasis Muchos estudiosos en el hogar y en el extranjero utilizando la proteína endostatina recombinante o mediante los experimentos de terapia génica endostatina muestran que la endostatina en una variedad de crecimiento de tumores sólidos y metástasis puede producir inhibición El tejido Bo con ratón endostatina recombinante casi completamente inhibido Ratones cáncer de pulmón de Lewis, melanoma, celuloma, células endoteliales vasculares, carcinoma de células renales y otro crecimiento de tumor primario, tratamiento después de 6 ciclos de tumor en latencia, después de detener No se produjo recurrencia del tumor y no se produjeron metástasis. Al mismo tiempo a nivel celular, existen experimentos que la endostatina puede inhibir la migración de células tumorales en un gel de membrana basal artificial. Perletti y otro uso de dimetilbenceno antraceno (DMBA) indujo el modelo animal de cáncer de mama de rata, 4 días consecutivos de inyección diaria subcutánea de endostatina 20 mg / kg, de modo que 4 semanas después de que el tumor sigue latente, lo que indica que endostatina El tumor primario también tiene un Efecto inhibitorio significativo.
La perspectiva de la endostatina
Endostatina desde el descubrimiento de entrar en la fase II de ensayos clínicos en curso, sólo unos pocos años, hizo progresos hizo que el mundo mucho alentado. Los experimentos muestran que la inhibición específica de la endostatina de las células endoteliales vasculares afirmó el papel de una variedad de dependientes de la producción de tumores sólidos tienen un efecto inhibitorio, y la resistencia a los fármacos y obvia efectos secundarios para el tratamiento clínico del tumor abrió un nuevo camino . Con la aclaración completa del mecanismo de la endostatina, y cómo la producción a gran escala, la purificación de la proteína de endostatina activa recombinante altamente eficiente, cómo extender la endostatina en la vida media in vivo, cómo elegir transporte seguro y eficiente para la terapia génica, Correctamente seleccionar las indicaciones y el tratamiento de una serie de problemas para resolver, creo que la endostatina en el tumor anti-angiogénico terapia tendrá una mayor aplicación perspectivas.
El mecanismo de acción de la endostatina
En la actualidad, el sistema de expresión de genes de endostatina humana recombinante incluye principalmente el sistema de expresión de Escherichia coli, el sistema de expresión de levadura, el sistema de expresión de células de mamífero y así sucesivamente. La expresión de Escherichia coli es alta, pero el producto es mayormente en forma de cuerpo de inclusión, que es insoluble y difícil de renaturalizar, causando una aplicación inconveniente, aunque es soluble en replegamiento de proteínas, pero este proceso perderá mucha proteína . Los productos de expresión de células de mamífero tienen una alta actividad pero tienen una expresión baja y son difíciles de purificar. Y la expresión de levadura es alta, fácil de ser purificado, de alta actividad, especialmente Pichia pastoris sistema de expresión es ampliamente utilizado en la expresión de endostatina, los Estados Unidos para la primera fase de ensayos clínicos de endostatina es la expresión de Pichia pastoris The O Reilly et al. Se utilizaron E. coli para expresar la endostatina en ratones portadores de tumor, 2,5 mg / kg redujeron el volumen tumoral del cáncer de pulmón de Lewis en un 53%, 10 mg / kg, el volumen tumoral se redujo en un 97% a 20 mg / kg, el tumor primario Fue casi completamente atrófica, y 0. 3 mg / (kg • d) de la endostatina podría inhibir completamente el crecimiento de metástasis de cáncer de pulmón de Lewis.