Importancia clínica de la fucosidasa
La definición y origen de la fucosidasa
Fucosidasa Definición: Una clase de enzimas que catalizan la hidrólisis de enlaces glucosídicos incluyen alfa-L-fucosidasa (EC 3.2.1.51), β-D-fucosidasa (EC 3.2.1.38), 1,2-alfa-L-fucosidasa (SEQ ID Nº: EC 3.2.1.63), respectivamente, hidrolizando los residuos L-fucosa terminales no reductores de diferentes formas de enlaces glicosídicos, en donde 1,2-α-L-fucosidasa con un alto grado de especificidad. Ciencias aplicadas: bioquímica y biología molecular (un sujeto); Enzima (dos sujetos).
En 1980 el erudito francés Deugnier otro estudio encontró que AFU en el diagnóstico de carcinoma hepatocelular en la sensibilidad, y la tasa positiva es la tasa de AFP-positivo Más de tres veces, AFP-A-L-fucosidasa (AFU) es un ácido lisosomal hidrolasa, Casos negativos y carcinoma de células pequeñas del diagnóstico de gran valor, el diagnóstico precoz de cáncer de hígado primario es un indicador útil. Y fue confirmado por muchos institutos de investigación.
Las características bioquímicas de la fucosidasa
AFU, principalmente involucrados en fucosyl-que contiene varios glicolípidos, glicoproteínas, mucopolisacáridos y catabolismo de otras macromoléculas. Ampliamente presente en los lisosomas del tejido corporal humano y fluidos corporales. Especies de suero, orina, saliva, lágrimas y otros especímenes pueden ser. Los especímenes deben ser aclarados, almacenados a 4 ℃ durante 3 días, -20 ℃ durante 3 meses, para evitar la congelación-descongelación repetida. Hemólisis, ictericia, lípidos sanguíneos altos, especímenes contaminados afectan seriamente los resultados.
Métodos para la determinación de fucosidasa
Método de fluorescencia: La hidrólisis de AFU de 4-metil umbeliferona α-L-fucopiranósido, la liberación de 4-metil paraguas cetona, con tampón alcalino para terminar la reacción, y el producto mostró fluorescencia, 360nm o 365 nm Longitud de onda de excitación y longitud de onda de emisión de 400nm O 448 nm para detectar la intensidad de fluorescencia, controlar la diferente concentración de 4-metil paraguas cetona preparada por la curva estándar para la actividad enzimática. Este método es altamente sensible, el límite de detección mínimo de 0.06U / L.
Método colorimétrico: 4-nitrofenil-α-L-fucopiranosido como sustrato por hidrólisis de AFU de liberación de 4-nitrofenol, el mismo tampón con alcalino para terminar la reacción, el 4-NP fue amarillo significativo, Se lee la Absorbancia A a la longitud de onda especificada. La actividad de AFU se calculó usando una curva estándar o absorbancia molar de 4-NP usando 4-NP puro como estándar. Este método es simple, los requisitos de equipo no son altos, ampliamente utilizado en el país y en el extranjero.
Importancia clínica de la fucosidasa
Carcinoma hepatocelular (HCC): La actividad AFU en suero de pacientes con carcinoma hepatocelular primario fue significativamente mayor que la de los controles normales, pero también significativamente mayor que la del cáncer de hígado metastásico, colangiocarcinoma, mesotelioma maligno, hemangioendotelioma maligno, cirrosis, quiste hepático congénito y Otras lesiones hepáticas benignas. El diagnóstico de cáncer de hígado primario fue de 64% -84%, especificidad de alrededor del 90%. AFU y AFP en pacientes con cáncer primario de hígado y cirrosis hepática mostraron que AFU y AFP se incrementaron en pacientes con cáncer de hígado primario y cirrosis hepática y AFP 500ng / mL fue el valor crítico para diagnosticar cáncer de hígado, la tasa de falsos positivos fue del 43% AFU740nmol / (ml.h) como valor crítico, la sensibilidad del 84%, especificidad del 94%. Por lo tanto, la AFU sérica para el diagnóstico de cáncer hepático primario tiene una alta sensibilidad y especificidad. La sensibilidad de la AFU fue del 87% y la especificidad del 78%, mientras que la de la AFP fue del 65% y del 89% (el límite diagnóstico fue de 20μg / L) para AFU y AFP en 24 pacientes con carcinoma hepatocelular. . Sugiriendo que la sensibilidad del diagnóstico de AFU es buena, y la especificidad es menor que la AFP. Actividad sérica AFU y tasa positiva de diámetro del cáncer de hígado y sin correlación significativa. La tasa positiva de AFU sérica en el grupo de carcinoma hepatocelular pequeño fue significativamente mayor que en el grupo AFP (70,8% vs 37,5%). AFP negativo y elevado AFP y no lo suficiente para diagnosticar cáncer de hígado primario, el suero AFU tasa positiva del 80,8%. La biopsia del hígado confirmó el cáncer de hígado primario, el suero AFU tasa positiva de la tasa de AFP positivo de más de 3 veces. La detección de AFU en pacientes cirróticos, como actividad aumentada, es más valiosa en la búsqueda de tumores más pequeños, donde la AFP no puede diagnosticar tumores más pequeños. Por lo tanto, la aplicación y la promoción de AFU como un nuevo indicador de diagnóstico de cáncer de hígado primario es de gran importancia, especialmente AFP-negativo y el carcinoma de células pequeñas del diagnóstico de mayor valor. Debido a que no hay correlación significativa con AFP puede ser el diagnóstico inicial, la detección combinada puede mejorar la tasa de detección de cáncer de hígado.
Embarazo y tumores ováricos: Los estudios han demostrado que con el aumento en el número de semanas de embarazo incrementos en la AFU plasmática en el parto natural o la interrupción artificial del embarazo, el rápido descenso en 5 días a la normal. La actividad sérica de AFU en pacientes con cáncer de ovario fue menor que en pacientes con cáncer de ovario y no tuvo correlación con estadio de enfermedad, carga tumoral, tipo histológico y diferenciación tumoral. La reducción de la actividad sérica de AFU en pacientes con cáncer de ovario benigno y maligno puede estar relacionada con factores genéticos
Otros: Almacenamiento de fucosidasa en pacientes con tejido congénito y fluidos corporales debido a la falta de AFU o actividad disminuida, dando lugar a glicoproteína o trastornos metabólicos glicolípidos. La AFU sérica aumentó en pacientes con cáncer gástrico, la pancreatitis aguda no aumentó la fibrosis quística asociada con la pancreatitis disminuyó, la distrofia piramidal progresiva y la actividad sérica de AFU disminuyeron.
El 81,2% de los pacientes con cáncer hepático primario con niveles séricos de AFU aumentó, y la detección combinada de AFP puede mejorar el diagnóstico de cáncer primario de hígado positivo tasa de 93,1%.
La observación dinámica del cáncer de hígado para determinar la eficacia, pronóstico, recurrencia de gran importancia.
La AFP sérica en cáncer de hígado metastásico, cáncer de pulmón, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer uterino también se puede aumentar; En cirrosis, hepatitis crónica, hemorragia gastrointestinal también aumentó ligeramente.